В контексте клеточной теории клетки являются основной структурной и функциональной единицей всех живых организмов. Сортировка клеток - это методология, которая используется для разделения различных клеток в соответствии с физиологическими и морфологическими особенностями. Они могут иметь внутриклеточные или внеклеточные характеристики. Взаимодействие ДНК, РНК и белков рассматривается как внутриклеточные интерактивные свойства, тогда как форма, размер и различные поверхностные белки рассматриваются как внеклеточные свойства. В современной науке методологии сортировки клеток помогли провести различные исследования в области биологических исследований, а также в разработке новых принципов посредством исследований в области медицины. Сортировка ячеек проводится по различным методологиям, которые включают как примитивные с меньшим количеством оборудования, так и передовые технологические методологии с использованием сложного оборудования. Проточной цитометрии, флуоресцентная активированная сортировка клеток (FACS), магнитный отбор ячеек и сортировка отдельных ячеек являются основными используемыми методологиями. Проточная цитометрия и FACS разработаны для дифференцировки клеток в соответствии с их оптическими свойствами. FACS является специализированным типом проточной цитометрии. Проточная цитометрия - это методология, которая используется при анализе гетерогенной популяции клеток по разным молекулам клеточной поверхности, размеру и объему, что позволяет исследовать отдельные клетки.. FACS - это процесс, при котором смесь образцов клеток сортируется в соответствии с их характеристиками рассеяния света и флуоресценции в два или более контейнера.. Это ключевое отличие между проточной цитометрией и FACS.
1. Обзор и основные отличия
2. Что такое проточная цитометрия
3. Что такое FACS
4. Сходства между проточной цитометрией и FACS
5. Сравнение бок о бок - проточная цитометрия и FACS в табличной форме
6. Резюме
Проточная цитометрия - это метод, который используется для изучения и определения экспрессии внутриклеточных молекул и поверхности клетки, а также для определения и характеристики различных типов клеток. Он также используется для определения объема и размера клеток и для оценки чистоты выделенных субпопуляций. Это позволяет проводить многопараметрическую оценку отдельных ячеек примерно в одно и то же время. Проточная цитометрия используется для измерения интенсивности флуоресценции, которая образуется благодаря флуоресцентно меченным антителам, которые помогают идентифицировать белки или лиганды, которые связываются с ассоциированными клетками..
Рисунок 01: Проточная цитометрия
Как правило, проточная цитометрия включает в себя три подсистемы в основном. Это жидкости, электроника и оптика. В проточной цитометрии доступно пять основных компонентов, которые используются при сортировке клеток. Они представляют собой проточную ячейку (поток жидкости, который используется для их транспортировки и выравнивания ячеек для процесса оптического зондирования), систему измерения (могут быть различных систем, включая ртутные и ксеноновые лампы, мощные с водяным охлаждением или маломощные лазеры с воздушным охлаждением или диодные лазеры), АЦП; Аналого-цифровой преобразователь, система усиления и компьютер для анализа. Сбор данных - это процесс, с помощью которого данные собираются из образцов с использованием проточного цитометра. Этот процесс опосредуется компьютером, который связан с проточным цитометром. Программное обеспечение, присутствующее в компьютере, анализирует информацию, поступающую на компьютер от проточного цитометра. Программное обеспечение также имеет возможность настройки параметров эксперимента, контролирующего проточный цитометр.
В контексте проточной цитометрии, Флуоресцентно-активированная сортировка клеток (FACS) - это метод, который используется для дифференциации и сортировки образца смеси биологических клеток. Ячейки отделяются от двух или более контейнеров. Метод сортировки основан на физических свойствах ячейки, которые включают характеристики рассеяния света и флуоресценции ячейки. Это важный научный метод, который можно использовать для получения надежных количественных и качественных результатов флуоресцентных сигналов, излучаемых каждой клеткой. Во время FACS, вначале, предварительно получается смесь клеток; суспензия направлена к центру узкой струи жидкости, которая быстро течет. Поток жидкости предназначен для разделения ячеек в суспензии в зависимости от диаметра каждой ячейки. Механизм вибрации применяется к потоку суспензии, что приводит к образованию отдельных капель.
Рисунок 02: FACS
Система откалибрована для создания одной капли с одной ячейкой. Непосредственно перед образованием капелек суспензия потока движется вдоль устройства измерения флуоресценции, которое определяет характеристику флуоресценции каждой ячейки. В точке образования капель размещается электрическое зарядное кольцо, которое индуцирует заряд в кольцо до измерения интенсивности флуоресценции. Как только капли образуются из потока суспензии, внутри капель захватывается заряд, который затем попадает в электростатическую отклоняющую систему. Согласно обвинению, система перенаправляет капли в разные контейнеры. Способ применения заряда варьируется в зависимости от различных систем, используемых в FACS. Оборудование, используемое в FACS, известно как сортировщик клеток с активированной флуоресценцией.
Проточная цитометрия против FACS | |
Проточная цитометрия - это методология, которая используется при анализе гетерогенной популяции клеток по разным молекулам клеточной поверхности, размеру и объему, что позволяет исследовать отдельные клетки.. | FACS - это процесс, при котором смесь образцов клеток сортируется в соответствии с их характеристиками рассеяния света и флуоресценции в два или более контейнера.. |
Клетка является основной структурной и функциональной единицей всех живых организмов. Сортировка клеток - это процесс, посредством которого клетки выделяются и дифференцируются в различные категории на основе их внутриклеточных и внеклеточных свойств. Проточная цитометрия и FACS - две важные методологии в сортировке клеток. Оба процесса разработаны для дифференцировки клеток в соответствии с их оптическими свойствами. Проточная цитометрия - это методология, которая используется во время анализа гетерогенной популяции клеток по разным молекулам клеточной поверхности, размеру и объему, что позволяет исследовать отдельные клетки. FACS - это процесс, при котором смесь образцов клеток сортируется в соответствии с их характеристиками рассеяния света и флуоресценции в два или более контейнера. В этом разница между проточной цитометрией и FACS.
Вы можете скачать PDF версию этой статьи и использовать ее в автономном режиме, как указано в примечании. Пожалуйста, загрузите PDF версию здесь Разница между проточной цитометрией и FACS