Разница между GFP и EGFP

ключевое отличие между GFP и EGFP является то, что GFP это белок дикого типа, включенный в молекулярное клонирование клеток не млекопитающих, тогда как EGFP представляет собой улучшенный или сконструированный тип GFP, который можно использовать на клетках млекопитающих.

Молекулярное клонирование - это продвинутый метод, который ученые очень широко используют для экспрессии белков с помощью рекомбинантных технологий. В технологии рекомбинантной ДНК необходимо успешно трансформировать рекомбинантный вектор в организм хозяина. Следовательно, в процессе трансформации следует идентифицировать и подтвердить, был ли ген, представляющий интерес, трансформирован или нет хозяину. Чтобы оценить это, молекулярные биологи применяют несколько методов. Из этих техник один является репортерным геном. Эти репортерные гены действуют как селектируемые маркеры для выбора правильных трансформантов. Таким образом, зеленый флуоресцентный белок (GFP) и улучшенный зеленый флуоресцентный белок (EGFP) являются двумя репортерными белками, используемыми в молекулярном клонировании..

СОДЕРЖАНИЕ

1. Обзор и основные отличия
2. Что такое GFP
3. Что такое EGFP
4. Сходства между GFP и EGFP
5. Сравнение бок о бок - GFP против EGFP в табличной форме
6. Резюме

Что такое GFP?

GFP представляет собой белок дикого типа, который содержит 238 аминокислотных остатков и несколько селектируемых областей аминокислотных последовательностей, которые отличают его от других флуоресцентных белков. Кроме того, этот белок дикого типа был первоначально изолирован от Экворея Виктория; тип медузы. Однако в природных явлениях медуза способна вызывать флуоресценцию зеленого цвета в ответ на определенные раздражители..

Ранее эта концепция удивила ученых, и они решили использовать ее на своих технологиях рекомбинантных ДНК. Следовательно, ученые использовали эту мутантную форму гена дикого типа в качестве репортерного гена в своих исследованиях экспрессии генов. Ген GFP дикого типа способен продуцировать белок, который дает флуоресценцию при комнатной температуре или в УФ-свете. Поэтому при вставке в трансформанты он экспрессируется и производит флуоресценцию. Если после процесса преобразования возникает флуоресценция, это подтверждает успех процесса преобразования. Проще говоря, флуоресцентная эмиссия сигнализирует об успешном превращении вектора, несущего интересующий ген, в хозяина..

Рисунок 01: GFP

По этой причине GFP действует как в естественных условиях маркер экспрессии генов. В настоящее время методы генной инженерии используются для производства GFP. Также доступно много улучшенных версий GFP, таких как EGFP. Следовательно, это позволяет эффективно использовать GFP в исследованиях молекулярного клонирования и экспрессии генов..

Что такое EGFP?

Enhanced Green Fluorescent Protein или EGFP - это улучшенная версия GFP. Проще говоря, мы можем определить EGFP как инженерную версию GFP дикого типа. Когда ген GFP дикого типа мутирует, он оказывает благоприятное воздействие. Следовательно, мутированный ген GFP позволяет экспрессировать новых персонажей, и в результате этого мы можем производить улучшенный GFP с улучшенными характеристиками. Кроме того, мы можем успешно ввести мутации в ген GFP дикого типа, используя облучение или химические методы. Эти мутированные гены затем продуцируют EGFP, который имеет более полезные характеристики.

Рисунок 02: EGFP

Улучшенные характеристики EGFP следующие:

• Способен излучать более сильные флуоресцентные сигналы.
• Имеет высокую чувствительность.
• Может использовать его на клетках млекопитающих вместо прокариот и других низкоуровневых эукариот.
• Также обеспечивает повышенную чистоту продукта.

Следовательно, по сравнению с GFP, EGFP является предпочтительным выбором для исследований экспрессии генов. Тем не менее, продукт более дорогой по сравнению с GFP.

Каковы сходства между GFP и EGFP?

• GFP и EGFP - два белка, способные излучать зеленый цвет
• Следовательно, оба функционируют как репортерные белки в исследованиях экспрессии генов.
• Также возможно синтезировать как с использованием технологии рекомбинантных ДНК.
• Кроме того, эти два типа легко мутировать в дальнейшем, чтобы синтезировать улучшенные формы..

В чем разница между GFP и EGFP?

Репортерный ген представляет собой ген, который связывается с геном, представляющим интерес для технологии рекомбинантных ДНК. Это сигнализирует об успешной трансформации рекомбинантного вектора в хозяина. Здесь GFP и EGFP - это два типа зеленых флуоресцентных белков, которые работают как репортерные белки. Однако ключевое различие между GFP и EGFP состоит в том, что GFP является диким типом, в то время как EGFP является разработанной версией GFP. Кроме того, EGFP обладает более полезными характеристиками, чем GFP. Например, EGFP производит более сильный флуоресцентный свет и является более чувствительным, чем GFP. Другое различие между GFP и EGFP - системы, в которых мы можем использовать их. Системы не млекопитающих используют GFP, в то время как системы млекопитающих используют EGFP.

Приведенная ниже инфографика представляет разницу между GFP и EGFP в табличной форме..

Резюме - GFP против EGFP

GFP и EGFP являются репортерными белками в исследованиях молекулярного клонирования и экспрессии генов. GFP представляет собой белок дикого типа, который представляет собой зеленый флуоресцентный белок. Первоначально белок был изолирован от медуз Экворея Виктория. Напротив, EFGP является улучшенной формой белка GFP. Это мутант дикого типа с улучшенными характеристиками. Следовательно, EFGP имеет более высокую мощность сигнала и более высокую чувствительность. Поэтому мы можем использовать его на переносчиках млекопитающих. В отличие от этого, использование GFP в основном только для переносчиков не млекопитающих. В целом, это разница между GFP и EGFP.

Ссылка:

1.Cinelli, R A, et al. «Улучшенный зеленый флуоресцентный белок как инструмент анализа динамики и локализации белка: исследование локальной флуоресценции на уровне одной молекулы». Фотохимия и фотобиология., Национальная медицинская библиотека США, июнь 2000 г. Доступно здесь  
2. «PDB101: Молекула месяца: зеленый флуоресцентный белок (GFP)». RCSB: PDB-101. Доступна здесь

Изображение предоставлено:

1. «GFP Fluorescent Protein Movie» Эрин Род - собственная работа, (CC BY-SA 4.0) через Commons Wikimedia 
2. «CA2 amigo2 eGFP mouse». Автор: Dudek, Serena; Куруана, Дуглас; Карстенс, Келли - собственная работа, (CC BY-SA 3.0) через Commons Wikimedia