В контексте микроскопии окрашивание рассматривается как существенный шаг при усилении контраста микроскопического изображения, особенно для выделения различных структур в биологических тканях. При окрашивании мазков периферической крови и костного мозга используются пятна Райта и Гимзы. Эти пятна известны как пятна Романовского. Оба эти пятна состоят из важных компонентов: окисленного метиленового синего, эозина Y и лазурных B красителей. Функция метиленового синего и лазурного В состоит в том, чтобы окрасить ядро цветами от синего до фиолетового. Эти пятна широко используются при изучении морфологии эритроцитов и при проведении дифференциального подсчета лейкоцитов. Диагностика различных заболеваний, таких как лейкемия, может быть достигнута с помощью процедур окрашивания Романовски. Окрашивание Райта используется для дифференцировки клеток крови, которые состоят из смеси эозина и метиленового синего красителей. Окрашивание по Гимзе используется во время окрашивания бактериальных клеток, а также клеток человека и может быть объединено с окрашиванием по Райту для создания окрашивания по Гимзе.. Это ключевое различие между окраской Гимза и окраской Райт.
Пятно Гимзы используется для цитогенетики и гистопатологической диагностики паразитов малярии и других паразитарных заболеваний. Пятно Гимзы также можно рассматривать как основное пятно при классификации лимфом в классификации Киля. Пятно Гимзы необходимо для Giemsa Banding, который обычно известен как G-Banding. Полоски Гимзы используются для окрашивания хромосом, а также для создания кариограмм. Хромосомные аномалии, такие как транслокации и перестройки, выявляются с помощью полос Гимзы. Окрашивание по Гимзе используется в гистологии благодаря высококачественному окрашиванию ядерной мембраны и хроматина, метахромазии некоторых клеточных компонентов и различным качествам цитоплазматического окрашивания в зависимости от типа клеток..
Рисунок 01: Пятно Гимзы
Раствор Giemsa содержит метиленовый синий, Azure B и эозин, и краситель готовят коммерчески с использованием порошка Giemsa. Стабильность окраски зависит от метиленовой лазури и ее смеси вместе с метиленовым синим, который образует эозинат. Окрашивание по Гимзе особенно характерно для фосфатных групп в цепи ДНК, и оно прикрепляется к областям, где присутствует большое количество аденин-тиминовых связей. В методе окрашивания по Гимзе тонкий слой образца первоначально помещают на микроскопическое предметное стекло вместе с несколькими каплями чистого метанола в течение примерно 30 секунд. Затем предметное стекло погружают в 5% -ный раствор красителя Гимзы, который готовится свежим, примерно на 20-30 минут. Наконец, предметное стекло промывают водопроводной водой и оставляют сушиться. Пятно Гимзы известно как дифференциальное пятно, потому что пятно Райта-Гимзы образуется, когда пятно Райта сочетается с Гимзой. Поэтому его можно использовать при исследовании патогенных бактерий, прикрепленных к клеткам человека. Здесь человеческие клетки и бактериальные клетки окрашиваются поочередно и наблюдаются пурпурный и розовый цвета соответственно.
Пятно Райта названо в честь Джеймса Гомера Райта, который изменил пятно Романовского. Пятно Райта используется для дифференциации типов клеток крови, поскольку помогает различать типы клеток крови. В результате, инфекции можно диагностировать, наблюдая количество лейкоцитов в крови. Пятно представляет собой смесь красного эозина и метиленовых синих красителей. Пятно Райта используется для окрашивания и наблюдения образцов мочи, мазков периферической крови и аспиратов костного мозга под световыми микроскопами. Пятно Райта используется при окрашивании хромосом в цитогенетике для диагностики ряда заболеваний и синдромов. Образцы мочи, окрашенные пятном Райта, идентифицируют эозинофилы, указывающие на инфекцию мочевых путей..
Рисунок 02: Пятно Райта
В процессе окраски Райта готовят высушенную на воздухе пленку крови, наносят окраску Райта и оставляют на 3 минуты. Затем добавляют буфер с равным количеством красителя, осторожно перемешивают и оставляют на 5 минут. Слайд держат горизонтально и хорошо промывают нейтральной дистиллированной водой. Наконец, его сушат и наблюдают под микроскопом..
Гимза Стейн против Райт Стейн | |
Окрашивание по Гимзе - это метод дифференциального окрашивания, используемый в основном для окрашивания бактериальных клеток, а также клеток человека.. | Пятно Райта представляет собой метод дифференциального окрашивания, используемый в основном при окрашивании мазков крови, образцов мочи и аспиратов костного мозга.. |
Окрашивание является важной лабораторной техникой, которая используется во время микроскопии, которая используется для повышения контрастности микроскопического изображения. Пятно Гимзы и пятно Райта, вместе известные как пятна Романовского, участвуют в проведении дифференциального подсчета лейкоцитов и изучении морфологии клеток эритроцитов. Окисленные метиленовый синий, эозин Y и лазурный B красители являются важными компонентами пятен Романовского. В первую очередь, окрашивание по Гимзе используется во время окрашивания бактериальных клеток, но также может применяться и для клеток человека. Окрашивание Райта широко используется при окрашивании мазков крови, образцов мочи и аспиратов костного мозга. В этом разница между пятном Гизмы и пятном Райта.
Вы можете скачать PDF версию этой статьи и использовать ее в автономном режиме, как указано в примечании. Пожалуйста, загрузите PDF версию здесь Разница между Giemsa Stain и Wright Stain
1. Barcia, J. J. «Пятно Гимзы: его история и применение». Международный журнал хирургической патологии., Национальная медицинская библиотека США, июль 2007 г., доступно здесь. Доступ 12 сентября 2017
2. Крафтс, K P и S E Pambuccian. «Окрашивание Романовским в цитопатологии: история, преимущества и ограничения». Биотехнология и гистохимия: официальная публикация Комиссии по биологическим пятнам. Национальная медицинская библиотека США, апрель 2011 г., доступно здесь. Доступ 12 сентября 2017
1. «Трипаносома-еванси-крыса-кровь-Гимза-окраска» Алана Р. Уокера - собственная работа (CC BY-SA 3.0) через Commons Wikimedia
2. «Мачтовая клетка, аспират костного мозга, пятно Райта (5916735712)» Эд Утман из Хьюстона, Техас, США - Мачтовая клетка, аспират костного мозга, пятно Райта, загружено CFCF (CC BY 2.0) через Commons Wikimedia