Разница между окраской по Грамму и кислотным голоданием

Ключевая разница - Gram Stain против Acid Fast

Бактерии очень маленькие микроорганизмы. Они прозрачны, и их обнаружение трудно в живых и неокрашенных условиях. Таким образом, различные методы окрашивания разработаны для облегчения обнаружения бактерий. Существует три основных типа методов окрашивания: простое окрашивание, дифференциальное окрашивание и структурное окрашивание. Дифференциальное окрашивание - это метод, который использует более одного окрашивания для дифференциации бактерий. Грамное пятно и кислотостойкое пятно наиболее широко известны как дифференциальные пятна. Окрашивание по Граму - это метод дифференциального окрашивания, который разделяет бактерии на две группы, известные как грамположительные бактерии и грамотрицательные бактерии. Кислотоустойчивое пятно является дифференциальным пятном, используемым для идентификации кислотоустойчивых организмов, таких как микобактерии, из некислотных быстрых организмов. Это ключевое различие между окраской по Граму и окраской Acid Fast.

СОДЕРЖАНИЕ

1. Обзор и основные отличия
2. Что такое Грам пятно
3. Что такое кислотно-быстрый
4. Сходство между Gram Stain и Acid Fast
5. Сравнение бок о бок - пятно Грамма и кислота быстро в табличной форме
6. Резюме

Что такое Грам пятно?

Окрашивание по Граму - важный метод дифференциального окрашивания, используемый для идентификации бактерий в микробиологии. Этот метод был введен датским бактериологом Гансом Кристианом Грамом в 1884 году. Окрашивание по Граму делит бактерии на две основные группы, называемые грамположительными и грамотрицательными, которые очень важны для классификации и идентификации бактерий. Микробиологи выполняют окрашивание грамм в качестве начального шага в характеристике бактерий во время своих исследований.

Бактерии сгруппированы на основе различий в их клеточной стенке. Грамположительные бактерии состоят из толстого слоя пептидогликана в их клеточной стенке, в то время как грамотрицательные бактерии состоят из тонкого слоя пептидогликана в их клеточной стенке. Результат окрашивания по Граму будет основан на разнице в толщине слоя пептидогликана клеточной стенки.

Окрашивание грамм проводится с использованием четырех различных реагентов, а именно; первичное пятно, протрава, обесцвечивающее вещество и встречное пятно. Кристаллический фиолетовый и сафранин используются в качестве первичных и встречных пятен, соответственно, в то время как граммы йода и 95% спирта используются в качестве протравы и обесцвечивателя, соответственно. Основные этапы окрашивания граммов заключаются в следующем;

Бактериальный мазок готовят на чистом предметном стекле, фиксируют и охлаждают.
Мазок заливают кристаллическим фиолетовым на 1 - 2 минуты.
Мазок промывают медленно проточной водопроводной водой, чтобы удалить лишние пятна.
Грамм йода наносится на мазок на 1 минуту.
Мазок промывают медленно проточной водопроводной водой
Мазок промывают 95% спиртом в течение 2 - 5 секунд и промывают медленной проточной водопроводной водой..
Мазь окрашивается сафранином в течение 1 минуты
Мазок промывают медленно проточной водопроводной водой, сушат и просматривают под микроскопом..

В конце грамм-пятна грамотрицательные бактерии будут иметь розовый цвет, а грамположительные бактерии - фиолетовый..

Рисунок 01: Грамотрицательные и грамположительные бактерии

Исход окрашивания по грамму определяется толщиной слоя пептидогликана в их клеточной стенке. На стадии обесцвечивания первичное пятно и протрава легко удаляются из грамотрицательных бактерий и становятся бесцветными, поскольку они имеют тонкий слой пептидогликана. Первичная окраска сохраняется у грамположительных бактерий, поскольку они имеют толстый слой пептидогликана. Встречное окрашивание не будет эффективным для грамположительных бактерий из-за сохранения первичного окрашивания. Таким образом, грамположительные бактерии будут видны в основном цвете пятна, то есть фиолетовом цвете. Встречная окраска окрасит грамотрицательные бактерии, и они будут видны в цвете выбора, который является цветом сафранина. Следовательно, легко классифицировать бактерии на две группы по окраске по Граму, и это ценно для дифференциации и идентификации бактерий..

Что такое Acid Fast?

Кислотостойкость - это физическое свойство некоторых бактерий, в частности их устойчивость к обесцвечиванию кислотами во время процедур окрашивания. После окрашивания эти организмы противостоят процедурам обесцвечивания на основе разбавленной кислоты и / или этанола, распространенным во многих протоколах окрашивания. Таким образом, название «кислотный голод» дано этим организмам. Это свойство проявляется благодаря высокому уровню воскового материала (миколиновых кислот) в клеточных стенках. Этот тест имеет решающее значение для идентификации Микобактерии туберкулеза.

Рисунок 2: кислые быстрые микобактерии

Это кислотно-быстрое пятно было разработано Полом Эрлихом в 1882 году. Метод кислотной быстрой эрлиховой модификации был изменен Циль-Нильсеном и теперь используется чаще. Кислотная быстрая процедура окрашивания включает три разных реагента. Карбол фушин используется в качестве основного окраски. Кислотный спирт используется в качестве обесцвечивающего агента. Метиленовый синий используется в качестве встречного пятна. Процедура окрашивания выполняется следующим образом.

Основное пятно (карбол фуксин) наносится на фиксированный образец на предметном стекле (все клетки будут окрашены в красный цвет).
Предметное стекло нагревают паром в течение 5 минут, что обеспечивает правильное попадание пятен в клетки..
Затем добавляется обесцвечивающий раствор (он удаляет краситель из всех клеток, кроме кислотоустойчивых бактерий).
Метиленовый синий добавляется в качестве встречного пятна (он окрашивает все обесцвеченные бактериальные клетки).
Кислотные быстрые бактерии остаются красными, в то время как некислые быстрые бактерии окрашиваются в синий.

Каковы сходства между Gram Stain и Acid Fast??

Окрашивание по Граму и Кислотное голодание - это два метода дифференциального окрашивания..
Оба метода делят бактерии на две группы.
Оба метода используют два пятна и одно обесцвечивание.

В чем разница между Gram Stain и Acid Fast??

Gram Stain против Acid Fast
Окрашивание по Граму - это метод дифференциального окрашивания, который разделяет бактерии на две группы. Грамположительные бактерии и Грамм..	Кислотное быстрое окрашивание является дифференциальным окрашиванием, используемым для идентификации кислотоустойчивых организмов из некислотных быстрых организмов..
Первичное пятно
Кристаллический фиолетовый является обычно используемым основным пятном при окрашивании по Граму..	Карбол фуксин является основным окраской, используемой в кислоте быстро.
Обесцвечивающий агент
95% спирт используется в качестве обесцвечивающего средства при окрашивании по Граму.	Кислотный спирт используется в качестве обесцвечивающего агента в кислоте быстро.
Встречное пятно
Грамное пятно использует сафранин как встречное пятно.	Кислотное быстрое окрашивание использует метиленовый синий в качестве встречного окрашивания.
наблюдение
Грам-отрицательные бактерии наблюдаются в цвете выбора, а грамположительные бактерии наблюдаются в пурпурном цвете..	Кислотно-быстрые бактерии наблюдаются в красном цвете, а некисло-быстрые бактерии наблюдаются в синем цвете.

Основная информация - Gram Stain против Acid Fast

Визуализация микроорганизмов в живом состоянии затруднена. Поэтому биологические пятна и процедуры окрашивания широко используются для изучения их свойств. Дифференциальное окрашивание является одним из видов техники окрашивания, используемой для дифференциации бактерий. Окрашивание по Граму и кислотное быстрое окрашивание - это два метода дифференциального окрашивания. Окрашивание по Граму дифференцирует грамотрицательные бактерии и грамположительные бактерии в зависимости от толщины их клеточных стенок. Кислотное быстрое окрашивание отличает кислотоустойчивые бактерии от некислотно-быстрых бактерий на основе содержания миколевой кислоты в клеточной стенке. В этом разница между кислотным и граммовым пятном.

Скачать PDF версию Gram Stain против Acid Fast

Вы можете скачать PDF версию этой статьи и использовать ее в автономном режиме, как указано в примечании. Пожалуйста, загрузите PDF версию здесь. Разница между Gram Stain и Acid Fast.

Ссылки:

1. Ариал, Сагар. «Кислотно-быстрое окрашивание - принцип, процедура, интерпретация и примеры». Микробиологические заметки онлайн. Н.П., 08 мая 2017 года. Веб. Доступна здесь. 20 июля 2017.
2. Дифференциальные пятна для идентификации бактерий: грамм, кислотостойкие и эндоспоры. Н.п., н.д. Web. Доступна здесь. 20 июля 2017.

Изображение предоставлено:

1. «Лимфатический узел - Атипичная микобактериальная инфекция (MAI) - окраска AFB» Яла Розена (CC BY-SA 2.0) через Flickr
2. «Грамное пятно 01» By Y tambe - файл Y tambe (CC BY-SA 3.0) через Commons Wikimedia

Наука и природа