Разница между гибридизацией in situ и иммуногистохимией

Ключевое отличие - гибридизация in situ и иммуногистохимия
 

Диагностика рака и инфекционных заболеваний является популярной тенденцией, где новые методы, основанные на протеомике и геномике, используются для идентификации опухолей или инфекционных клеток, их пролиферации и мест развития клеток, а также анализа генетической основы большинства инфекционных и неинфекционных заболеваний. Это приведет к точной обработке и разработке лекарств, а также к разработке индивидуальных методов лечения заболеваний. Гибридизация in situ (ISH) и иммуногистохимия (IHC) являются двумя такими широко используемыми методами в биологии рака, и ключевое различие между гибридизацией in situ и иммунохимией заключается в молекулах, которые используются в процедуре анализа.. В ISH зонды нуклеиновой кислоты используются в анализе, тогда как в IHC моноклональные и поликлональные антитела используются для диагностических определений..

СОДЕРЖАНИЕ

1. Обзор и основные отличия
2. Что такое гибридизация in situ?
3. Что такое иммуногистохимия
4. Сходство между гибридизацией in situ и иммуногистохимией
5. Сравнение бок о бок - гибридизация in situ и иммуногистохимия в форме таблицы
6. Резюме

Что такое гибридизация in situ (ISH)?

Гибридизация in situ представляет собой метод гибридизации нуклеиновых кислот, который выполняется непосредственно на части или участке ткани, во всей ткани или в клетках. Методика зависит от теории спаривания комплементарных оснований Уотсона-Крика, что приводит к гибридам ДНК-ДНК или гибридам ДНК-РНК, которые могут обнаруживать мутированные гены или идентифицировать требуемый интересующий ген. Последовательности одноцепочечной ДНК, последовательности двухцепочечной ДНК, последовательности одноцепочечной РНК или синтетические олигонуклеотидные последовательности используются в качестве зондов в процессе гибридизации, и эти зонды мечены радиоактивным фосфором на его 5'-конце для процедур идентификации после авторадиографии или маркированы с использованием флуоресцентных красителей. , Существуют различные типы доступных методов ISH, основанных на типе используемого зонда и типе применяемой техники визуализации..

Рисунок 01: Флуоресцентная гибридизация in situ

Существует множество применений ISH, главным образом, в молекулярной диагностике инфекционных заболеваний для выявления наличия патогенных микроорганизмов и подтверждения патогенных микроорганизмов с помощью молекулярной диагностики. Он также используется в областях биологии развития, кариотипирования и филогенетического анализа и физического картирования хромосом..

Что такое иммуногистохимия (IHC)?

В методике IHC основной анализируемой молекулой является антиген. Во время IHC моноклональные и поликлональные антитела используются для определения наличия антигенов при инфекции или статусе пролиферации злокачественных клеток. Этот метод основан на связывании антиген-антитело, и для этого метода используются ферментные метки; одним из таких применений является ELISA (иммуноферментный анализ с ферментным связыванием). Маркерами также могут быть антитела с флуоресцентной меткой или антитела с радиоактивной меткой.

Рисунок 02: Иммуногистохимия

IHC широко используется для обнаружения раковых клеток. Диагностические процедуры нацелены на антигены, присутствующие в опухолевых клетках, чтобы идентифицировать и охарактеризовать опухоль. Эта же процедура включена для диагностики инфекционных агентов. Моноклональные и поликлональные антитела также используются для анализа различных генных продуктов, обеспечивая реакцию связывания антитело-антиген между желаемым белком и введенным синтетическим антителом..

Каковы сходства между гибридизацией in situ и иммуногистохимией??

• ISH и IHC - высокоспецифичные реакции.
• Оба метода очень точны.
• Оба метода могут быть использованы для диагностики рака и инфекционных заболеваний..
• Эти методы выполняются в стерильных условиях in-vitro..
• Оба быстрые методы, которые обеспечивают воспроизводимые результаты.
• ISH и IHC используют методы обнаружения, такие как радиомаркировка и методы флуоресценции.

В чем разница между гибридизацией in situ и иммуногистохимией?

Гибридизация in situ и иммуногистохимия
ISH представляет собой метод гибридизации нуклеиновых кислот, который выполняется непосредственно на части или секции ткани или всей ткани.	IHC - это метод, в котором моноклональные и поликлональные антитела используются для определения наличия антигенов, которые представляют собой специальные белковые маркеры, размещенные на поверхности клеток..
Тип анализируемых биологических молекул
ISH анализирует нуклеиновые кислоты.	IHC анализирует белки-антигены.
Основа биохимической реакции
В этой технике происходит комплементарное спаривание оснований между ДНК-ДНК или ДНК-РНК..	Антиген-антитело взаимодействия участвуют в иммуногистохимии.
Методы ферментативного обнаружения
Методы обнаружения, связанные с ферментом, не могут быть использованы в ISH.	Методы обнаружения, связанные с ферментом, могут быть использованы в IHC.

Резюме - гибридизация in situ и иммуногистохимия

Молекулярная диагностика - это быстрые и подтверждающие методы, которые можно использовать для выявления неинфекционных заболеваний, таких как рак или инфекционные заболевания, такие как ВИЧ или туберкулез, на основе молекулярных маркеров, присутствующих в клетках, которые приводят к проявлению заболевания. Молекулярные маркеры могут присутствовать в форме экспрессированных белков или на генетическом уровне, на основе которого вводятся различные новые методы для повышения эффективности и они менее трудоемки, хотя эти методы требуют больших затрат. Таким образом, ISH зависит от образования гибридной ДНК-ДНК или ДНК-РНК, а IHC зависит от специфических реакций между антителом и антигеном. В этом разница между гибридизацией in situ.

Скачать PDF-версию гибридизации in situ против иммуногистохимии

Вы можете скачать PDF версию этой статьи и использовать ее в автономном режиме, как указано в примечании. Пожалуйста, загрузите PDF версию здесь. Различие между гибридизацией in situ и иммуногистохимией.

Ссылки:

1. Duraiyan, Jeyapradha, et al. «Применение иммуногистохимии». Журнал «Фармация и биологические науки», Medknow Publications & Media Pvt Ltd, август 2012 г., доступно здесь. Доступ 24 августа 2017.
2. «Гибридизация in situ (ISH)». Национальный центр биотехнологической информации, Национальная медицинская библиотека США, доступен здесь. Доступ 24 августа 2017.

Изображение предоставлено:

1. «FISH (Флуоресцентная гибридизация in situ)» MrMatze - собственная работа (CC BY-SA 3.0) через Commons Wikimedia
2. «Иммуногистохимическое окрашивание2» Имоен из Википедии на английском языке (CC BY-SA 3.0) через Викисклад Commons