Разница между Phusion и Taq-полимеразой

Ключевая разница - Phusion против Taq Полимеразная

ДНК-полимеразы являются широко используемыми ферментами в методах молекулярной биологии, а также естественным образом присутствуют во всех организмах, которые подвергаются репликации ДНК. Они являются ключевыми полимеризующими ферментами, которые участвуют в процессе репликации. ДНК-полимераза способна добавлять нуклеотиды к свободному 3'-концу цепи ДНК, вызывая тем самым расширение новой цепи. В настоящее время, благодаря достижениям молекулярной биологии в диагностике заболеваний и в промышленных применениях, важно производить полимеразы, обладающие различными полезными свойствами. Это повышает точность метода и делает его более быстрым методом. Phusion и Taq полимераза являются двумя коммерчески производимыми термостабильными полимеразными ферментами, которые используются в специальных молекулярных применениях. Phusion представляет собой ДНК-полимеразу, выделенную из Pyrococcus furiosus и в основном используется в экспериментах по клонированию для повышения точности воспроизведения. ДНК-полимераза Taq является стандартной ДНК-полимеразой, используемой в полимеразной цепной реакции (ПЦР), и она выделяется из термостабильной бактерии; Thermus aquaticus. ключевое отличие между двумя ферментами является источником микроорганизма. Фузия изолирована от экстремофилов, Pyrococcus furiosus в то время как Taq-полимераза выделяется из термофила, Thermus aquaticus.

СОДЕРЖАНИЕ

1. Обзор и основные отличия
2. Что такое Phusion
3. Что такое Taq-полимераза
4. Сходство между Phusion и Taq-полимеразой
5. Сравнение бок о бок - Phusion против Taq полимеразы в табличной форме
6. Резюме

Что такое Phusion?

Phusion ДНК-полимераза является новой полимеразой, которая производится путем выделения фермента из Pyrococcus furiosus, который является экстремофильной архей. Эти микробы находятся в условиях чрезвычайно высокой температуры, что делает полимеразу высокостабильной термомеразой. Phusion полимераза используется для получения предельной точности по сравнению с обычной термостабильной полимеразой; Так полимераза. Phusion полимераза способна амплифицировать длинные матрицы до 7,5 килобайт геномной ДНК. Оптимальная способность полимеризации Phusion полимеразы составляет 72⁰C. Phusion также используется в продуктах клонирования для секвенирования, анализа экспрессии и анализа мутаций..

Phusion ДНК-полимераза обладает 3 '- 5' экзонуклеазной активностью. Это позволяет корректировать вновь синтезированную цепь после синтеза. Следовательно, нуклеотидные несоответствия легко устраняются. Таким образом, он имеет меньшую частоту ошибок. Общие преимущества Phusion полимеразы:

Чрезвычайная Верность
Высокая скорость и сокращенное время продления
Надежные реакции и требует минимальной оптимизации
Высокая доходность

Рисунок 01: Фьюжн

Основным недостатком Phusion polymerase является то, что он ингибируется в присутствии дезоксиуридин трифосфата (dUTP). Когда dUTP накапливаются в реакционной смеси, это может ингибировать действия Phusion полимеразы. Это предотвращается обработкой реакционной смеси дУТФазой перед добавлением фермента. В настоящее время устойчивый к dUTP вариант Phusion полимеразы, известный как Pfu Turbo, используется вместо Phusion полимеразы в качестве лекарства от этой проблемы..

Что такое Taq-полимераза?

Taq ДНК-полимераза Изобретение произвело революцию в области молекулярной биологии. Это решило главную проблему в амплификации ДНК. ДНК-полимераза Taq представляет собой термостабильный полимеразный фермент, выделенный и выделенный из термофильной бактерии., Thermus aquaticus. Открытие этого фермента приводит к развитию ПЦР. Этот фермент позволил использовать полимеразную цепную реакцию в амплификации ДНК вместо традиционных трудоемких методов клонирования. ПЦР в настоящее время используется в молекулярной диагностике, сельском хозяйстве и промышленности, и в методику добавлено много новых вариантов..

Рисунок 02: Taq-полимераза

ДНК-полимераза Taq функционирует в оптимальном интервале температур между 72⁰С - 80⁰C. Taq ДНК-полимераза требует кофактора; магний для его функции. Taq-полимераза не обладает способностью корректировать 3 '- 5', поэтому частота ошибок ДНК-полимеразы Taq высока по сравнению с более новыми типами ДНК-полимераз, такими как Phusion полимераза и т. Д. Но популярность ДНК-полимеразы Taq остается То же самое во всем мире науки из-за удобства и гибкости фермента.

Каковы сходства между Phusion и Taq-полимеразой?

И ферменты Phusion, и Taq-полимераза являются полимеризующими ферментами, способными добавлять нуклеотиды к 3 'свободному концу цепи ДНК..
Полимеразы Phusion и Taq требуют последовательности праймера для инициирования полимеризации..
Полимеразы Phusion и Taq являются термостойкими.
Как Phusion, так и Taq-полимеразы используются в механизмах ПЦР для амплификации ДНК..
При добавлении полимеразы к реакционной смеси, полимеразы Phusion и Taq добавляются последними, чтобы обеспечить эффективность фермента..
Полимеразы Phusion и Taq коммерчески синтезированы для экспериментальных целей молекулярной биологии..
Полимеразы Phusion и Taq нуждаются в кофакторе для завершения своей функции..

В чем разница между Phusion и Taq-полимеразой?

Phusion против Taq-полимеразы
Phusion представляет собой ДНК-полимеразу, выделенную из Pyrococcus furiosus и в основном используется в экспериментах по клонированию для повышения точности.	ДНК-полимераза Taq является стандартной ДНК-полимеразой, используемой в полимеразной цепной реакции (ПЦР), и ее выделяют из термостабильной бактерии., Thermus aquaticus.
Исходный организм
Phusion извлекается из экстремофильных архей - Pyrococcus furiosus.	Эти литературные произведения охватывают период колонизации и деколонизации..
Способность к чтению
3 '- 5' способность читать доказательства присутствует в Phusion.	3 '- 5' способность к прочтению доказательства отсутствует в Taq-полимеразе.
верность
Высокое качество с Phusion.	Taq-полимераза показывает низкую точность.
усиление
Phusion способен амплифицировать длинные фрагменты ДНК.	Taq-полимераза способна амплифицировать значительно более короткие фрагменты ДНК.
отравление
Фузионное действие тормозится накоплением нечетных.	Taq-полимераза не ингибируется dUPT.

Резюме - Phusion vs Taq полимеразной

Phusion и Taq DNA polymerase - это две термостабильные полимеразы, которые используются в методах ПЦР. Phusion - это полимераза, выделенная из экстремофилов, Pyrococcus furiosus в то время как Taq выделен из термостабильных бактерий Thermus aquaticus. Открытие Taq ДНК-полимеразы приводит к изобретению ПЦР. Phusion имеет много преимуществ по сравнению с Taq, что делает Phusion лучшим вариантом для получения ДНК с высокой точностью. Однако Taq-полимераза все еще используется в качестве стандартного полимеразного фермента в ПЦР. В этом разница между Phusion и Taq-полимеразой.

Ссылка:

1. Биолабы, Новая Англия. «Так-ДНК-полимеразы». Биолабы Новой Англии: реагенты для индустрии наук о жизни. Доступна здесь
2. «Фузионная ДНК-полимераза». Новая Англия Биолаб. Доступна здесь

Изображение предоставлено:

1.'GAM проиллюстрировано Nivin Nasri'By NivinN - собственная работа, (CC BY-SA 4.0) через Commons Wikimedia
2.'Taq'By Adenosine - собственная работа, (CC BY-SA 3.0) через Commons Wikimedia

Наука и природа