Разница между RP ВЭЖХ и HIC

ключевое отличие между RP HPLC и HIC является то, что В RP ВЭЖХ используется более полярная подвижная фаза и менее полярная стационарная фаза. Принимая во внимание, что HIC использует гидрофобную стационарную фазу, которая позволяет гидрофобным молекулам прикрепляться к ней.

Хроматография - это аналитическая техника, которая помогает разделить смесь на составляющие. Во-первых, мы должны растворить образец для разделения в раствор. Эта смесь раствор-вещество называется подвижной фазой. Затем подвижная фаза проходит через другой материал, называемый стационарной фазой. Стационарная фаза определяет разделение компонентов. Разделение происходит из-за разделения материала между подвижной фазой и неподвижной фазой..

СОДЕРЖАНИЕ

1. Обзор и основные отличия
2. Что такое ВЭЖХ?
3. Что такое HIC
4. Сравнение бок о бок - ВЭЖХ RP и HIC в табличной форме
5. Резюме

Что такое RP ВЭЖХ??

Термин RP ВЭЖХ обозначает Высокоэффективная жидкостная хроматография с обращенной фазой. Это включает разделение компонентов в смеси, согласно гидрофобности. Гидрофобные компоненты в подвижной фазе связаны с иммобилизованными гидрофобными лигандами на неподвижной фазе, в то время как гидрофильные компоненты элюируются через неподвижную фазу, не прикрепляясь к поверхности неподвижной фазы..

Рисунок 01: Аппарат ВЭЖХ

Кроме того, этот метод обладает большей воспроизводимостью по сравнению с другими хроматографическими методами, а также показывает широкую применимость. Поэтому мы используем этот метод в лабораториях для более чем 75% всех методов ВЭЖХ. Большую часть времени мы используем водную смесь воды с смешивающимся полярным органическим растворителем в качестве подвижной фазы. Таким образом, это обеспечит прикрепление гидрофобных компонентов в растворе к поверхности неподвижной фазы.

Что такое HIC?

Термин HIC обозначает Хроматография с гидрофобным взаимодействием. Это тип ВЭЖХ с обращенной фазой, и этот метод используется главным образом для разделения больших биомолекул, таких как белки. В этом методе нам нужно использовать водную среду, чтобы сделать образец биомолекулы. Это потому, что органические растворители могут вызвать денатурацию белков. Более того, в этой методике используется взаимодействие крупных молекул со слегка гидрофобной поверхностью неподвижной фазы. Кроме того, мы должны использовать высокую концентрацию соли в образце, потому что это способствует сохранению белка на упаковке; этот процесс называется высаливанием. Постепенно уменьшая концентрацию соли, мы можем заставить элюировать биомолекулы в зависимости от их гидрофобности..

Обычно в этом методе используются условия, противоположные условиям ионообменной хроматографии. В этом методе, во-первых, нам нужно пропустить буферный раствор через колонку, чтобы уменьшить сольватацию растворенного вещества в образце. Это делает гидрофобные области белка, чтобы выставить. Однако, когда молекула является более гидрофобной, требуется меньше соли, чтобы способствовать связыванию. Здесь менее гидрофобные растворенные вещества элюируются первыми, и в соответствии с изменением концентрации соли, более гидрофобные растворенные вещества элюируются последними..

В чем разница между ВЭЖХ RP и HIC?

Хроматография - это аналитическая методика разделения компонентов в смеси. RP ВЭЖХ и HIC являются двумя специализированными хроматографическими методами. Ключевое различие между RP HPLC и HIC состоит в том, что RP HPLC использует более полярную подвижную фазу и менее полярную стационарную фазу, тогда как HIC использует гидрофобную стационарную фазу, которая позволяет гидрофобным молекулам присоединяться к ней..

Приведенная ниже инфографика суммирует разницу между RP ВЭЖХ и HIC.

Резюме - RP ВЭЖХ против HIC

Хроматография - это аналитическая методика разделения компонентов в смеси. RP ВЭЖХ и HIC являются двумя специализированными хроматографическими методами. Основное различие между RP HPLC и HIC состоит в том, что RP HPLC использует более полярную подвижную фазу и менее полярную стационарную фазу, тогда как HIC использует гидрофобную стационарную фазу, которая позволяет гидрофобным молекулам присоединяться к ней..

Ссылка:

1. «Режимы разделения ВЭЖХ». Воды, Доступные здесь.

Изображение предоставлено:

1. «Препаративная ВЭЖХ» от GYassineMrabetTalk & # x2709; Это W3C-неопределенное векторное изображение было создано с помощью Inkscape. - собственная работа (CC BY 3.0) через Commons Wikimedia