Рекомбинация и трансформация - два важных шага в генной инженерии, когда характеристики организма преднамеренно модифицируются путем манипулирования его генетическим материалом. Рекомбинация - это процесс, при котором чужеродная ДНК включается в векторный геном и образуется молекула рекомбинантной ДНК. Трансформация является следующим этапом, на котором рекомбинантная молекула вводится в организм хозяина. Клетка-хозяин или организм облегчают экспрессию рекомбинантной молекулы. Ключевое различие между трансформантами и рекомбинантами заключается в том, что трансформанты являются клетки или организмы, которые принимают рекомбинантную молекулу внутрь и облегчают экспрессию пока рекомбинанты представляют собой векторы, которые позволяют вставлять чужеродную ДНК в ее геном и транспортировать в трансформантов-хозяев для экспрессии.
СОДЕРЖАНИЕ
1. Обзор и основные отличия
2. Что такое трансформанты
3. Что такое рекомбинанты
4. Сравнение бок о бок - трансформанты против рекомбинантов
5. Резюме
Трансформантами являются клетки или организмы, в которых рекомбинантная ДНК берется для экспрессии. Бактерии обычно используются в качестве организмов-хозяев в генной инженерии, поскольку их легко выращивать, размножать и обрабатывать в лабораторных условиях, а процесс трансформации легче по сравнению с другими организмами. Наиболее популярной бактерией-хозяином, используемой в генной инженерии, является бактерия. E coli.
В процессе трансформации клетки-хозяева вынуждены поглощать рекомбинанты. Однако некоторые клетки-хозяева не поглощают рекомбинантные молекулы. Они известны как нетрансформанты, а клетки, которые содержат рекомбинантные молекулы ДНК внутри, известны как трансформанты. Отбор трансформантов из нетрансформантов осуществляется с использованием селектируемых маркеров в молекулярной биологии. Выбираемые маркеры вставляются в векторный геном вместе со вставкой ДНК. Обычно используемые селектируемые маркеры представляют собой гены устойчивости к антибиотикам. Маркерные гены облегчают дифференцировку трансформантов и продолжают процесс. После процесса трансформации бактерию выращивают в среде, содержащей антибиотики. Только трансформанты способны расти на этой среде, поскольку они обладают рекомбинантами внутри.
Как только молекула рекомбинантной ДНК трансформируется внутри организма-хозяина, чужеродная ДНК может либо интегрироваться в геном клетки-хозяина, либо оставаться неинтегрированной в цитоплазме. Однако экспрессия и репликация чужеродной ДНК происходят в организме хозяина и дают желаемый результат в процессе.
Рекомбинант - это организм или клетка, которая обладает рекомбинантным геномом, содержащим чужеродную ДНК. Рекомбинанты являются результатом процесса генной инженерии. Они искусственно построены в пробирке вставляя интересующие гены и модифицируя геном. Часто бактериальные плазмиды и бактериофаги действуют как рекомбинанты в генной инженерии. У него химера разных ДНК. Молекула рекомбинантной ДНК несет чужеродную ДНК в организм хозяина и заставляет ее экспрессировать и образовывать желаемый продукт.
Рекомбинантные молекулы конструируются с использованием эндонуклеаз рестрикции и ДНК-лигаз. Нужный фрагмент ДНК отделяют от исходного организма и вставляют в вектор, чтобы сделать рекомбинант для трансформации. Разрезание гена, представляющего интерес, и открытие организма-вектора должны проводиться с использованием одного и того же рестрикционного фермента для создания совместимых липких концов, чтобы соединить их вместе. Как только чужеродная ДНК включена в векторный геном, она известна как рекомбинантная или рекомбинантная молекула ДНК.
Рисунок 02: Рекомбинантная ДНК
Трансформанты против Рекомбинантов | |
Трансформанты - это клетки, которые содержат рекомбинантную молекулу ДНК внутри. | Рекомбинанты - это молекулы-носители, у которых чужеродная ДНК встроена в собственный геном.. |
Экспрессия чужеродной ДНК | |
Это клетки-хозяева, которые способны экспрессировать рекомбинантную ДНК. | Они должны быть способны к самовоспроизводству в организме хозяина.. |
выбор | |
Клетки, которые можно легко выращивать и размножать, отбирают в качестве клеток-хозяев.. | Они должны быть легко извлекаемыми и содержать выбираемые маркеры. |
Трансформанты - это клетки или организмы с рекомбинантными молекулами ДНК внутри них. Рекомбинанты - это организмы или клетки, которые подверглись генетической рекомбинации и имеют чужеродную ДНК в своих геномах. Бактериальные клетки часто используются в качестве клеток-хозяев для трансформации, а плазмиды и бактериофаги часто используются в качестве векторов в технологии рекомбинантных ДНК. В этом разница между трансформантами и рекомбинантами.
Ссылки:
1. Гриффитс, Энтони Дж. Ф. «Создание рекомбинантной ДНК». Введение в генетический анализ. 7-е издание. Национальная медицинская библиотека США, 1 января 1970 г. Веб. 08 апреля 2017
2. Купер, Джеффри М. «Рекомбинантная ДНК». Клетка: молекулярный подход. 2-е издание. Национальная медицинская библиотека США, 1 января 1970 г. Веб. 08 апреля 2017
Изображение предоставлено:
1. «Рекомбинантное образование плазмид» от Minestrone Soup из английской Википедии (CC BY-SA 3.0) через Commons Wikimedia