Хотя теоретическая термодинамика взаимодействий антиген-антитело хорошо известна, их практическое использование для обнаружения или определения аутоантител мало. Для функциональных антител определение оптимальной аффинности позволяет достичь максимальной терапевтической пользы. Аффинность антител изучалась почти полвека, и с момента появления аффинной хроматографии три десятилетия назад она превратилась в мощный инструмент. Сродство описывает взаимодействие в отдельном сайте связывания. Знание аффинности, а также свойств конструкции и антигена имеет важное значение для оценки связи между аффинностью и активностью функционального антитела. Однако в дополнение к аффинности существует еще одна концепция связывания, называемая авидностью, которая представляет собой общую силу связывания взаимодействия между многовалентным антигеном и многовалентным антителом. Несмотря на явные различия между ними, термины «близость» и «авидность» часто используются без разбора. Давайте посмотрим на два.
Сродство - это сила связывания одного паратопа молекулы антитела с соответствующим эпитопом на молекуле антигена. Он описывает взаимодействие в отдельном сайте связывания. Знание аффинности, а также свойств конструкции и антигена имеет важное значение для оценки связи между аффинностью и активностью функционального антитела. Он основан на тех же термодинамических принципах, которые управляют любым обратимым биомолекулярным взаимодействием, той же силой связывания, которая позволяет вашей иммунной системе бороться с инфекциями. И сила относится к силе специфической связи между антителом и его антигеном. Точная и точная оценка сродства к взаимодействию антиген-антитело является важным измерением для установления пределов сродства и потолка активности терапевтического антитела. В термодинамических терминах сродство выражается суммированием всех сил притяжения, приводящих к увеличению силы сцепления и отталкивающих сил, что приводит к снижению прочности сцепления.
Авидность является еще одним обязательным понятием, которое часто путают со сродством; фактически оба термина относятся к концепции силы связывания, за исключением того, что авидность относится к общей силе антигенсвязывающей способности смеси поликлональных антител. Авидность проявляется, когда многовалентный антиген связывается с двухвалентным антителом в растворе или когда антитело связывается с двумя молекулами одновалентного антигена на поверхности. В отличие от аффинности, авидность описывает многовалентное связывание между несколькими сайтами связывания лиганда и лигата соответственно. Проще говоря, авидность - это сила связывания между многовалентным антителом и многовалентным антигеном. Авидность не может быть описана термодинамическими терминами, и получается с помощью кинетических измерений. Авидность антитела зависит от сродства отдельных сайтов связывания антитела, но больше, чем аффинность связывания, поскольку все взаимодействия антитело-антиген должны быть разорваны одновременно, чтобы антитело полностью диссоциировало.
Термины сродство и авидность иногда неуместно используются в качестве синонимов. На самом деле оба термина относятся к понятию прочности связывания. Аффинность определяется в термодинамических терминах как измерение степени ассоциации между антителом и антигеном, в то время как общая прочность, связывающая многовалентное антитело с многовалентным антигеном, называется авидностью или иначе известна как «функциональная аффинность». Аффинность - это сила связывания сайта, объединяющего антитела, с одним соответствующим антигенным эпитопом, тогда как авидность - это общая сила антигенсвязывающей способности смеси поликлональных антител. Авидность также называют функциональной близостью.
Термин аффинность обозначает константу внутренней ассоциации между антителом и одновалентным лигандом, таким как гаптен, тогда как термин авидность используется для обозначения общей энергии связывания между антителами и многовалентным антигеном. Константа ассоциации является мерой аффинности антитела к эпитопу. Авидность не может быть описана термодинамическими терминами, и получается с помощью кинетических измерений. В термодинамических терминах сродство выражается в виде суммирования энергии межмолекулярных притягивающих и отталкивающих сил ближнего радиуса между антигенной детерминантой и ее сайтом связывания..
Аффинность антител может играть решающую роль в определении биологической активности антител. Таким образом, необходимо уметь характеризовать ответ антител с точки зрения аффинности, а также величины, а также понимать, как сродство антитела может влиять на конкретный анализ. Термин авидность иногда используется как синоним аффинности, но чаще всего он используется для описания способности антител образовывать стабильные комплексы с антигеном. Авидность - это накопленная сила множественного сродства отдельных сайтов связывания антител..
Несмотря на их различия, термины аффинность и авидность часто используются без разбора. Аффинность представляет собой силу связывания одного паратопа молекулы антитела с соответствующим эпитопом на молекуле антигена и может быть определена только одним моновалентным фрагментом Fab. Это сумма всех сил притяжения, приводящих к увеличению силы сцепления и отталкивающих сил, приводящих к снижению прочности сцепления. Авидность, с другой стороны, представляет собой силу связывания между многовалентным антителом и многовалентным антигеном и также называется функциональной аффинностью. Измеренная энергия связи между антителами и их соответствующими антигенами отражает авидность антител. В отличие от аффинности, авидность не может быть описана термодинамическими терминами и получается с помощью кинетических измерений..