Разница между аффинностью и ионообменной хроматографией

ключевое отличие между аффинностью и ионообменной хроматографией заключается в том, что мы можем использовать аффинную хроматографию для разделения заряженных или незаряженных компонентов в смеси, тогда как мы можем использовать ионообменную хроматографию для разделения заряженных компонентов в смеси.

Хроматография - это метод, который мы можем использовать для разделения желаемых компонентов в смеси. Существуют различные типы, такие как жидкостная хроматография, газовая хроматография и т. Д. Аффинная хроматография и ионообменная хроматография являются двумя подкатегориями жидкостной хроматографии. Кроме того, в этих методах есть две фазы. А именно, они являются стационарной фазой и подвижной фазой. Цель этих методов состоит в том, чтобы отделить компоненты, в зависимости от связывания компонентов, в подвижной фазе на поверхности стационарной фазы..

СОДЕРЖАНИЕ

1. Обзор и основные отличия
2. Что такое аффинная хроматография
3. Что такое ионообменная хроматография
4. Сравнение бок о бок - сродство к ионообменной хроматографии в табличной форме
5. Резюме

Что такое аффинная хроматография?

Аффинная хроматография - это биохимический метод, который мы используем для разделения компонентов в смеси в зависимости от взаимодействия между этими компонентами..

Взаимодействия, которые мы используем в этом случае, включают в себя следующее:

1. Антиген-антитело взаимодействия
2. Фермент-субстрат взаимодействия
3. Рецептор-лигандные взаимодействия
4. Белково-нуклеиновые кислоты взаимодействия

В этом методе мы используем молекулярные свойства молекул для этого метода разделения. Здесь мы позволяем желаемому соединению взаимодействовать со стационарной фазой посредством водородной связи, ионного взаимодействия, дисульфидных мостиков, гидрофобного взаимодействия и т. Д. Молекулы, которые не взаимодействуют со стационарной фазой, будут элюироваться первыми. Таким образом, мы можем отделить его от смеси. Желаемое соединение останется присоединенным к стационарной фазе. Следовательно, мы можем отделить его с помощью элюирующего растворителя и сделать его элюированным, чтобы отделить его.

Рисунок 01: Хроматографическая колонка

Аффинная хроматография полезна для очистки и концентрирования вещества из смеси с использованием буферного раствора. Кроме того, это помогает уменьшить количество нежелательных веществ в смеси. При рассмотрении устройства, которое мы используем для этого процесса, мы должны использовать столбец, заполненный нашей стационарной фазой. Затем мы должны загрузить подвижную фазу, которая содержит биомолекулы, которые мы собираемся разделить. Далее позвольте им связываться со стационарной фазой. После этого, используя промывочный буфер, мы можем отделить нецелевые биомолекулы, но молекулы-мишени должны иметь высокое сродство к стационарной фазе, чтобы успешно разделить процесс..

Что такое ионообменная хроматография?

Ионная хроматография - это форма жидкостной хроматографии, в которой мы можем анализировать ионные вещества. Часто мы используем его для анализа неорганических анионов и катионов (то есть хлоридных и нитратных анионов и калия, катионов натрия). Хотя это не так часто, мы можем анализировать и органические ионы. Кроме того, мы можем использовать эту технику для очистки белков, потому что белки являются заряженными молекулами при определенных значениях рН. Здесь мы используем твердую стационарную фазу, к которой могут прикрепляться заряженные частицы. Например, мы можем использовать смолу полистирол-дивинилбензол сополимеры в качестве твердого носителя.

Рисунок 02: Фазы ионообменной хроматографии

Чтобы объяснить это далее, стационарная фаза имеет фиксированные ионы, такие как сульфат-анионы или катионы четвертичного амина. Все это должно ассоциироваться с противоионом (ионом с противоположным зарядом), если мы хотим сохранить нейтралитет этой системы. Здесь, если противоион является катионом, то мы называем систему катионообменной смолой. Но, если противоион представляет собой анион, система представляет собой анионообменную смолу.

Есть пять основных фаз в процессе ионного обмена;

1. Начальная стадия
2. Адсорбция мишени
3. Начало элюции
4. Конец элюции
5. перерождение

В чем разница между аффинностью и ионообменной хроматографией?

Аффинная хроматография - это биохимический метод, который мы используем для разделения компонентов в смеси в зависимости от взаимодействия между этими компонентами, в то время как ионная хроматография является формой жидкостной хроматографии, в которой мы можем анализировать ионные вещества. Следовательно, основное различие между аффинной и ионообменной хроматографией заключается в том, что мы можем использовать ионообменную хроматографию только для разделения ионных веществ, тогда как аффинная хроматография способна разделять как заряженные, так и незаряженные частицы. При рассмотрении принципа работы различие между аффинностью и ионообменной хроматографией заключается в том, что аффинная хроматография происходит из-за того, что молекулы-мишени обладают высоким сродством к стационарной фазе. Однако для ионообменной хроматографии молекулы-мишени имеют заряд, противоположный заряду поверхности неподвижной фазы.

Приведенная ниже инфографика представляет разницу между аффинностью и ионообменной хроматографией в качестве сравнения друг с другом..

Резюме - Аффинность против ионообменной хроматографии

Таким образом, аффинная и ионообменная хроматография являются двумя формами жидкостной хроматографии. Ключевое различие между аффинной и ионообменной хроматографией заключается в том, что мы можем использовать аффинную хроматографию для разделения заряженных или незаряженных компонентов в смеси, тогда как мы можем использовать ионообменную хроматографию для разделения заряженных компонентов в смеси..

Ссылка:

1. «Аффинная хроматография». Википедия, Фонд Викимедиа, 5 октября 2018 г. Доступно здесь 
2. Libretexts. «Ионообменная хроматография». Химия LibreTexts, Libretexts, 29 декабря 2016 года. Доступно здесь  

Изображение предоставлено:

1. «Никелевая смола» By Pdcook - собственная работа (CC BY-SA 3.0) через Commons Wikimedia 
2. «Iex» от Даляка (Public Domain) через Викисклад Commons