Электрофорез против электроосмоса
Методы физического разделения, такие как фильтрация, дистилляция, колоночная хроматография, не являются легкими методами, когда речь идет о разделении некоторых молекул. Электрофорез и электроосмос являются двумя другими методами разделения, которые могут быть использованы для разделения заряженных частиц.
Что такое электрофорез?
Электрофорез - это метод разделения молекул на основе их размеров. Основополагающим для такого разделения является заряд молекулы и ее способность двигаться в электрическом поле. Это наиболее распространенный и основной метод в молекулярной биологии для разделения молекул, особенно ДНК и белков. Это в основном используется, потому что это относительно легко и недорого. Аппарат для электрофореза может быть немного сложным, и его подготовка занимает некоторое время. Но мы можем легко сделать аппарат электрофореза из того, что у нас есть в лаборатории. Методы электрофореза могут варьироваться в зависимости от наших целей. Мы можем использовать одномерный электрофорез для разделения ДНК или белка. Двумерный электрофорез используется, когда требуется больше разрешенных образцов (как в случае отпечатков пальцев). Гель используется в качестве поддерживающей среды для разделения молекул. Этот гель можно приготовить в виде плоских листов или в тюбиках. Основой этой процедуры является разделение молекул в зависимости от скорости их движения через гель при подаче электрического поля. Отрицательно заряженные молекулы, такие как ДНК, стремятся к положительному полюсу в этом электрическом поле, в то время как положительно заряженные молекулы стремятся к отрицательному полюсу. Два типа гелей используются при электрофорезе как агароза и полиакриламид. Эти два имеют разные разрешающие способности. Гель действует как сито для фильтрации молекул разных размеров. Установленные в геле электростатические заряды действуют как сила.
Разделение зависит от подвижности ионов.
F = бс = Зи
V = ZeE / f
F = сила, действующая на частицу
f = коэффициент трения
V = средняя скорость миграции
Z = заряд мигрирующей частицы
е = элементарный заряд
E = напряженность электрического поля
Необходимые условия для электрофореза относительно просты. При изготовлении геля и запуске образца используется буфер. Маркеры и красители используются для целей визуализации.
Что такое электроосмос?
Это процесс перемещения жидкости через материал с использованием приложенного электрического поля. Движение может осуществляться через пористый материал, вдоль капилляра, мембраны и т. Д. Это может быть использовано в качестве техники разделения (особенно капиллярного электроосмоса). Скорость жидкости линейно пропорциональна приложенному электрическому полю. Это также зависит от материала, использованного для построения канала, и используемого решения. На границе раздела раствор и материал получили противоположные заряды, и это известно как электрический двойной слой. Когда к раствору прикладывают электрическое поле, двойной электрический слой движется под действием кулоновской силы. Это известно как электроосмотический поток.
В чем разница между электрофорезом и электроосмосом? • При электрофорезе твердые частицы (макромолекулы, такие как нуклеиновые кислоты или белки) перемещаются с помощью электрического поля. Но в электроосмосе жидкость движется. • При электрофорезе твердый материал подложки представляет собой гель. Но это электроосмос, это может быть гель, мембрана, капилляр и т. Д.. |