Разница между нитроцеллюлозой и нейлоновой мембраной

Ключевая разница - нитроцеллюлоза против нейлоновой мембраны
 

Блоттинг является важным методом обнаружения специфических последовательностей ДНК, РНК и белков из их смесей в молекулярной биологии. Это делается с помощью мембраны под названием блот. Существуют различные методы блоттинга, такие как северный, южный и западный блоттинг. Выбор правильной мембраны для процесса блоттинга должен быть тщательно сделан, чтобы предотвратить неспецифическое связывание и неправильные обнаружения. Нитроцеллюлоза, нейлон и PVDF являются обычно используемыми мембранами в методах блоттинга. У них разные характеристики. Основное различие между нитроцеллюлозой и нейлоновой мембраной заключается в том, что нитроцеллюлозные мембраны обладают высоким потенциалом иммобилизации белка в то время как нейлоновые мембраны имеют высокий потенциал иммобилизации нуклеиновых кислот. Тем не менее, оба типа мембран часто используются в методах блоттинга.

СОДЕРЖАНИЕ
1. Обзор и основные отличия
2. Что такое нитроцеллюлозная мембрана
3. Что такое нейлоновая мембрана
4. Сравнение нитроцеллюлозы и нейлона
5. Резюме

Что такое нитроцеллюлозная мембрана?

Нитроцеллюлозная мембрана является широко используемым мембранным фильтром в методах блоттинга нуклеиновых кислот и белков. Обладает высоким связывающим белком потенциалом. Следовательно, нитроцеллюлозные мембраны широко используются в технике вестерн-блоттинга. Нитроцеллюлозные мембраны совместимы со всеми методами гибридизации и демонстрируют превосходную способность к связыванию без помех. Нитроцеллюлозные мембраны по своей природе являются гидрофильными. Они осуществляют гидрофильное взаимодействие с молекулами и эффективно иммобилизуют их на мембране. Коммерческие нитроцеллюлозные мембраны доступны с двумя размерами пор: 0,45 и 0,2 мкм..

Рисунок 01: нитроцеллюлозная мембрана, используемая в вестерн-блоттинге

Что такое нейлоновая мембрана?

Нейлоновая мембрана является еще одним типом коммерческой мембраны, используемой в методах блоттинга. Это альтернативно используется с нитроцеллюлозными мембранами для южного и северного блоттинга. Нейлоновые мембраны идеальны для саузерн-блоттинга, чем нитроцеллюлоза из-за их высокого сродства к связыванию с ДНК. Из-за нескольких уникальных особенностей нейлоновых мембран, исследователи обычно используют нейлоновые мембраны для южной и северной блоттинга вместо нитроцеллюлозной мембраны. В отличие от нитроцеллюлозы, нейлоновые мембраны также рекомендуются для снятия изоляции и проведения повторных испытаний..

Рисунок 02: Нейлоновая мембрана, используемая для южной промокания

В чем разница между нитроцеллюлозой и нейлоновой мембраной?

Нитроцеллюлоза против нейлоновой мембраны
Нитроцеллюлозные мембраны хрупкие.	Нейлоновые мембраны менее хрупкие.
Обращение
С ними сложно обращаться.	Они просты в обращении.
повторное зондирование
Неподдерживаемые нитроцеллюлозные мембраны трудно перерабатывают.	Перепробовать легко с нейлоновыми мембранами.
Совместимость с различными условиями хранения
Нитроцеллюлозные мембраны обладают меньшей прочностью, чтобы выдерживать различные условия хранения.	Нейлоновые мембраны более устойчивы к различным условиям хранения..
использование
Требуется предварительное увлажнение.	Предварительное смачивание не требуется для нейлоновых мембран.
Гидрофильная природа
Нитроцеллюлозные мембраны являются гидрофильными по природе, но менее гидрофильны, чем нейлоновые мембраны..	Они очень гидрофильны по своей природе.
Потенциал иммобилизации
Нитроцеллюлозные мембраны имеют меньшее сродство к нуклеиновым кислотам. Но он имеет высокое сродство к белкам.	Нейлоновые мембраны имеют более высокий потенциал связывания с нуклеиновыми кислотами, чем нитроцеллюлозные мембраны..

Резюме - Нитроцеллюлоза против нейлоновой мембраны

Нитроцеллюлозные и нейлоновые мембраны представляют собой специальные листы, используемые в технике блоттинга для воспроизведения рисунка полос на геле. Они обеспечивают возможность обнаружения определенной последовательности или белка из смесей путем иммобилизации их на мембране. Как только молекулы иммобилизованы на мембране, ее можно использовать в качестве субстрата для гибридизационного анализа с мечеными зондами. Нитроцеллюлозную мембрану обычно используют для обнаружения белка в технике вестерн-блоттинга из-за ее высокой аффинности связывания с белками. Нейлоновые мембраны часто используются для южной и северной блоттинга. В этом разница между нитроцеллюлозой и нейлоновой мембраной.

Ссылки:
1. Хейс, П. С., В. Р. Вольф и Дж. Д. Хейс. «Методы блоттинга для изучения ДНК, РНК и белков». BMJ: Британский медицинский журнал. Национальная медицинская библиотека США, 14 октября 1989 года. Веб. 07 апреля 2017
2. Махмуд, Тахрин и Пинг-Чанг Ян. «Вестерн-блот: техника, теория и устранение неисправностей». Североамериканский журнал медицинских наук. Medknow Publications & Media Pvt Ltd, сентябрь 2012 г. Интернет. 07 апреля 2017

Изображение предоставлено:
1. «Передача вестерн-блоттинга» Bensaccount из английской Википедии (CC BY 3.0) через Commons Wikimedia