Разница между нитроцеллюлозой и ПВДФ

Ключевая разница - нитроцеллюлоза против PVDF
 

Вестерн-блоттинг - это метод, который позволяет обнаруживать и количественно определять конкретные белки из образца белка. Надежность методики зависит от выбора правильной мембраны для поглощения белков из геля. Существуют разные типы микропористых мембран. Мембраны из нитроцеллюлозы и PVDF - две такие мембраны, предпочитаемые исследователями из-за их особых свойств по сравнению с другими типами мембран. Выбор между нитроцеллюлозой или PVDF также является другой проблемой в вестерн-блоттинге. И нитроцеллюлоза, и PVDF обладают высокой способностью абсорбировать белок. Основное различие между нитроцеллюлозой и PVDF-мембраной заключается в том, что нитроцеллюлозные мембраны не способны удалять антитела и повторно использовать мембрану для повторной обработки антител, в то время как PVDF-мембраны обладают способностью к удалению и повторному использованию..

СОДЕРЖАНИЕ
1. Обзор и основные отличия
2. Что такое нитроцеллюлоза
3. Что такое PVDF
4. Сравнение бок о бок - нитроцеллюлоза против PVDF
5. Резюме

Что такое нитроцеллюлоза?

Нитроцеллюлоза является полимером, полученным путем обработки целлюлозы азотной кислотой, и используется для изготовления микропористых мембран в молекулярной биологии, особенно для таких методов блоттинга, как южный, северный и западный блоттинг. Размеры пор нитроцеллюлозных мембран варьируются от 3 до 20 мкм. Нитроцеллюлозные микропористые мембраны облегчают обнаружение иммунохимической реакции, происходящей на поверхности мембраны. Поэтому нитроцеллюлозные мембраны часто используются для иммобилизации белков и обнаружения специфических белков при вестерн-блоттинге. Нитроцеллюлозные мембраны также могут иммобилизовать гликопротеины и нуклеиновые кислоты.

Нитроцеллюлозные мембраны являются предпочтительными в анализах бокового потока из-за нескольких особенностей. Нитроцеллюлозные мембраны поглощают белки в высокой концентрации. Растворитель, используемый для смачивания мембраны, не уменьшает абсорбцию белка нитроцеллюлозной мембраной. Нитроцеллюлозные мембраны можно легко разрезать до желаемого размера геля и переносить белки из геля в мембрану путем электрического или капиллярного переноса. Нитроцеллюлоза обеспечивает более быстрый поток белков через мембрану с высоким потенциалом связывания. Нитроцеллюлоза демонстрирует улучшенную прочность при обработке. Еще один особый атрибут нитроцеллюлозной мембраны заключается в том, что ее можно легко приклеить водостойким клеем, не содержащим растворителей, на различные пластиковые подложки..

Рисунок 01: нитроцеллюлозная мембрана для вестерн-блоттинга

Что такое ПВДФ?

Поливинилидендифторид (PVDF) является фторполимером, полученным путем полимеризации винилидендифторида, и обладает высокой иммобилизационной способностью белков. Поэтому микропористые мембраны, изготовленные из PVDF, используются в методах вестерн-блоттинга для анализа специфических белков из смесей белков. Мембраны PVDF также можно использовать для аминокислотного анализа и секвенирования белка. Наиболее важной характеристикой PVDF-мембраны над нитроцеллюлозной мембраной является то, что ее можно легко удалить с антител и использовать повторно для последующих исследований антител..

Мембраны из PVDF толще нитроцеллюлозных; следовательно, более устойчивы к повреждениям при повторном использовании. Мембраны из PVDF обладают высокой гидрофобностью. Поэтому перед употреблением их необходимо вымочить в метаноле или изопропаноле..

В чем разница между нитроцеллюлозой и ПВДФ?

Нитроцеллюлоза против ПВДФ
Нитроцеллюлоза представляет собой полимер, состоящий из целлюлозы.	PVDF представляет собой фторполимер, полученный полимеризацией винилидендифторида.
Размер пор мембраны
Типичные размеры пор 0,1, 0,2 или 0,45 мкм.	Типичные размеры пор 0,1, 0,2 или 0,45 мкм.
Емкость связывания белка
Нитроцеллюлоза имеет белково-связывающую способность от 80 до 100 мкг / см.2.	PVDF обладает способностью связывать белок от 170 до 200 мкг / см.2.
чувствительность
Это имеет низкую чувствительность по сравнению с PVDF.	Это имеет высокую чувствительность.
Обнаружение малоэкспрессируемых белков
Поскольку чувствительность к нитроцеллюлозным мембранам низкая, она не подходит для обнаружения слабо экспрессируемых белков..	Это больше подходит для обнаружения слабо экспрессируемых белков из-за его высокой чувствительности.
Фоновый шум
Это имеет более низкий фоновый шум	Это имеет более высокий фоновый шум.
Взаимодействие с белками
Молекулы белка связываются с нитроцеллюлозными мембранами посредством гидрофобных взаимодействий.	Белки связываются с мембранами PVDF через гидрофобные и дипольные взаимодействия.
Природа Мембраны
Нитроцеллюлоза хрупкая и хрупкая. Тем не менее, существуют версии нитроцеллюлозы, и они устойчивы.	ПВДФ более долговечен и обладает большей химической стойкостью.
Способность раздевать и повторно использовать
Нитроцеллюлоза может испытывать трудности при зачистке и повторном тестировании без потери сигнала..	PVDF идеально подходит для приложений для ребробирования и секвенирования.
годность
Нитроцеллюлоза идеально подходит для обнаружения низкомолекулярных белков.	PVDF больше подходит для обнаружения белков с более высокой молекулярной массой.
Другое использование
Нитроцеллюлозу можно использовать для анализа нуклеиновых кислот и точечного / щелевого блоттинга.	PVDF может быть использован для секвенирования белка и систем твердофазного анализа.
Стоимость
Это дешевле, чем мембраны PVDF.	Это дороже нитроцеллюлозных мембран.
Необходимость предварительного смачивания
Нитроцеллюлозные мембраны не требуют предварительного замачивания метанолом	Мембраны PVDF требуют предварительного замачивания с метанолом.

Резюме - Нитроцеллюлоза против ПВДФ

Нитроцеллюлозные мембраны были первыми коммерчески используемыми мембранами для анализа бокового потока. Они обладают высокой способностью поглощать белки. Поэтому нитроцеллюлозные мембраны используются в вестерн-блоттинге. PVDF является другим типом мембран, используемых в вестерн-блоттинге, и он также обладает высокой способностью абсорбировать белок. Оба типа используются в вестерн-блоттинге для анализа белка. Однако мембраны PVDF обладают более особыми свойствами, что делает их более подходящими, чем нитроцеллюлозные мембраны, для вестерн-блоттинга. Но нитроцеллюлозные мембраны больше подходят для обнаружения низкомолекулярных белков, мембраны PVDF больше подходят для обнаружения высокомолекулярных белков. В этом разница между нитроцеллюлозными и ПВДФ мембранами.

Изображение предоставлено:
1. «Передача вестерн-блоттинга» By Bensaccount из английский Википедия (CC BY 3.0) через Commons Wikimedia

Ссылка:
1.Люке-Гарсия, Хосе Л., Ге Чжоу, Тун-Тянь Сунь и Томас А. Нойберт. «Использование нитроцеллюлозных мембран для характеристики белка с помощью матричной лазерной десорбции / ионизационной масс-спектрометрии». Аналитическая химия. Национальная медицинская библиотека США, 15 июля 2006 г. Веб. 28 марта 2017
2. «Молекулярные маркеры и биотехнология растений». Google Книги. Н.п., н.д. Web. 28 марта 2017
3. Понедельник, 8 апреля 2013 г. Tweet. «Магия в мембране: мудро выбирай результаты Best Western Blot». Biocompare. Н.П., 8 апреля 2013 г. Интернет. 28 марта 2017