Разница между YAC и M13 фаговым вектором

Ключевая разница - YAC против фагового вектора M13
 

Клонирование ДНК является важным процессом, который позволяет размножать важные фрагменты ДНК организмов. Требуется соединение определенной ДНК с векторной ДНК для создания рекомбинантной ДНК, которая трансформируется в организм хозяина. Вектор - это молекула ДНК, которая ведет себя как средство переноса чужеродного генетического материала в другую клетку или организм. Он должен быть способен реплицироваться в организме хозяина и производить множество копий рекомбинантной ДНК. Существуют разные виды векторов, используемых при клонировании ДНК. Дрожжевая искусственная хромосома (YAC) и фаговый вектор M13 относятся к двум типам. Ключевое различие между вектором фага YAC и M13 заключается в том, что YAC - это искусственная хромосома, которая размножается в клетках дрожжей пока Фаговый вектор M13 представляет собой одноцепочечную кольцевую ДНК бактериофага M13, которая реплицируется в E Coli ячейки.

СОДЕРЖАНИЕ
1. Обзор и основные отличия
2. Что такое YAC
3. Что такое фаговый вектор M13
4. Сравнение бок о бок - фаговый вектор YAC против M13
5. Резюме

Что такое вектор YAC?

YAC - это искусственно созданная хромосома, способная нести большой сегмент чужеродной ДНК и реплицироваться в клетках дрожжей. Он имеет центромерные, теломерные и автономно реплицируемые последовательности, необходимые для репликации и стабильности. YAC также должен иметь селективный маркер или маркеры и сайты рестрикции, чтобы сделать его эффективным вектором клонирования. Большие последовательности в диапазоне от 1000 до 2000 кб могут быть вставлены в YAC и перенесены в дрожжи.

Рисунок 01: Вектор YAC

Что такое фаговый вектор M13?

Бактериофаг М13 - это вирус, который заражает и размножается в E Coli. Геном бактериофага М13 небольшой по размеру, около 6,7 т.п.н. Это одноцепочечная, круговая и позитивная по смыслу ДНК. Этот вирус специально заражает E Coli бактерии через F. pilus. Как только он входит в ssDNA в бактерию, он синтезирует свою комплементарную цепь и становится dsDNA или репликативной формой (RF) M13. RF может вести себя как плазмида в организме хозяина. ДцДНК реплицируется в E Coli и производит ssDNA, несущий новые фаги. Эти новые фаги постоянно высвобождаются из E Coli без убийства клетки-хозяина. Тем не менее, инфекция замедляет рост кишечной палочки. дцДНК может быть выделена из бактериальных клеток и использована в качестве векторов при клонировании ДНК. Они известны как фаговые векторы M13. Их можно легко манипулировать и использовать аналогично плазмидным векторам.

Врожденная способность инфекции этих фагов M13 служит хорошей квалификацией для использования в качестве вектора в клонировании генов. При разработке M13 в вектор, несколько элементов должны быть включены в его геном. Это ген белка lac-репрессора (lac I), проксимальная область оператора LAC Z ген, промотор lac и сайт множественного клонирования (полилинкер). Когда дцДНК М13 используется в качестве векторов, она может рассматриваться как плазмидный вектор. Однако использование ssDNA M13 имеет преимущества в секвенировании ДНК и сайт-направленном мутагенезе..

Поскольку фаговый вектор M13 несет множественный сайт клонирования в LacZ области, рекомбинированные векторы могут быть легко идентифицированы с помощью скрининга сине-белых колоний на чашках с агаром, содержащих IPTG и X-Gal. Голубые бляшки, полученные на пластинках, не содержат рекомбинированных фагов. Следовательно, фаги со вставками могут быть выбраны для целей клонирования..

Рисунок 02: Бактериофаг М13

В чем разница между YAC и M13 Phage Vector??

YAC против M13 Phage Vector
YAC - это генно-инженерная хромосома, способная нести большой сегмент чужеродной ДНК и реплицироваться в клетках дрожжей..	Фаговый вектор М13 представляет собой вирусный вектор, разработанный бактериофагом М13, который используется для вставки чужеродной ДНК в E Coli.
Цель
YAC были разработаны для клонирования больших фрагментов геномной ДНК в дрожжи.	Векторы фага M13 используются для вставки чужеродной ДНК в E Coli.
Длина вставки
YAC могут содержать геномные вставки размером с мегабазу (1000 кб - 2000 кб).	Размер вкладышей около 1500 бит / с.
строительство
ДНК YAC трудно очистить неповрежденными и требует высокой концентрации для создания векторной системы YAC.	Это происходит через циклическую фотосинтетическую электронную цепь.
стабильность
YAC нестабилен.	Фаги M13 могут быть легко извлечены.
Размер
Ферменты большие молекулы.	Фаги M13 более стабильны, чем YAC.

Резюме - YAC против M13 Phage Vector

YAC - это искусственно сконструированная векторная система, использующая специфическую область дрожжевой хромосомы для вставки больших сегментов генетического материала в клетки дрожжей. Фаговый вектор M13 представляет собой векторную систему, полученную из бактериофага M 13, которая использует E coli как организм хозяина. В этом основное различие между YAC и M13 Phage Vector. Оба одинаково полезны в технологии рекомбинантных ДНК и клонировании генов..

Ссылка:
1.»Вектор». Генетика-заметки - Вектор. Н.п., н.д. Web. 16 мая 2017 года. Https://genetics-notes.wikispaces.com/Vector
2. «Дрожжевая искусственная хромосома». Wikipedia. Фонд Викимедиа, 21 апреля 2017 года. Интернет. 16 мая 2017. .

Изображение предоставлено:
1. «M13B» от J3D3 - собственная работа (CC BY-SA 3.0) через Commons Wikimedia