Разница между RT-PCR и QPCR

Обратная транскрипционная полимеразная цепная реакция (ОТ-ПЦР)

ОТ-ПЦР против КПЦР

Достижения в области биотехнологии привели к открытию нескольких способов справиться с потребностями в пересадке органов на протяжении многих лет. Раньше человек, который добровольно пожертвовал какой-либо орган сразу после смерти нуждающемуся пациенту, мог только запустить операцию по пересадке. Непрерывные исследования и исследования биологов ведут к открытию стволовых клеток..

Стволовые клетки относятся к тем, которые взяты из ДНК эмбриона, которые будут служить источником для регенерации клеток, которые в основном были бы клоном органа, где была извлечена ДНК. Хотя правозащитники лоббируют прекращение таких процедур, успешные операции действительно доказали эффективность разработок стволовых клеток при трансплантации органов..

Однако прежде чем можно будет оценить и полностью понять стволовые клетки, необходимо ознакомиться с различными терминологиями, связанными с этим научным открытием. Культивирование стволовых клеток связано с ДНК и ее кодированием. Таким образом, для студентов или любых лиц, заинтересованных в данной области, важно различать ОТ-ПЦР и КПЦР..

Обратная транскрипционная полимеразная цепная реакция (ОТ-ПЦР) является одним из многих вариантов полимеразной цепной реакции или ПЦР. Этот лабораторный метод широко используется в молекулярной биологии для того, чтобы ученые могли создать несколько копий определенной последовательности ДНК с помощью процесса, придуманного как «амплификация». Разница между ОТ-ПЦР и традиционной ПЦР заключается в том, что РНК сначала транскрибируется обратно в свой ДНК-комплемент, который использует обратную транскриптазу. Новая комплементарная ДНК, содержащая обратную транскрипцию, будет затем амплифицирована с использованием традиционной ПЦР или ПЦР в реальном времени.

Большинство студентов, изучающих этот процесс, часто совершают ошибку, меняя местами ПЦР с обратной транскрипцией и ПЦР в реальном времени, так как они сокращенно схожи. Чтобы избежать путаницы, биологи маркируют ПЦР в реальном времени как количественную ПЦР в реальном времени или КПЦР.

КПЦР сильно отличается от ОТ-ПЦР, поскольку КПЦР отвечает за измерение усиления по мере его возникновения. Можно сказать, что RT-PCR запускает процесс амплификации, в то время как qPCR измеряет его во время процедуры..

Количественная ПЦР в реальном времени

QPCR фактически произвел революцию в традиционном методе одностороннего подхода, когда дело доходит до количественного определения ДНК и РНК, поскольку применение метода qPCR позволяет биологам определить начальную концентрацию нуклеиновой кислоты еще до того, как будут получены результаты реакции, и записал.

Применение КПЦР, которое в настоящее время считается наиболее мощным и чувствительным методом анализа для генетических исследований, значительно расширилось. В настоящее время он участвует в количественном анализе экспрессии генов, генотипировании, обнаружении патогенов и анализе SNP, наряду с измерениями интерференции РНК..

QPCR часто сочетается с процессом обратной транскрипции для количественной оценки РНК-мессенджера и микроРНК, присутствующих в клетках тканей, наблюдаемых и экспериментирующих. Это тогда дает другое видимое различие между ними: RT-PCR может использоваться для процесса амплификации, но для количественной оценки его необходимо объединить с КПЦР..

QPCR также, как известно, является более количественным, поскольку данные могут быть собраны по мере экспоненциального (логарифмического) роста фазы ПЦР. Биологи отмечают, что количество побочного продукта ПЦР прямо пропорционально количеству матричной нуклеиновой кислоты, которое будет измеряться с помощью КПЦР.

С другой стороны, ОТ-ПЦР далека от количественного характера, так как соблюдение интенсивности усиленной полосы на геле в соответствии с установленным стандартом концентрации может привести к «полуколичественному» выводу..

Резюме:

1.QPCR и RT-PCR - термины, используемые в биотехнологии и используемые для производства множества копий ДНК..
2.РТ-ПЦР используется для усиления обратной транскрипции кода ДНК; QPCR измеряет усиление.
3. РТ-ПЦР для амплификации, а КПЦР для количественного определения.
4.QPCR носит количественный характер, в то время как ОТ-ПЦР не.