SDS PAGE против гель-электрофореза
Электрофорез может быть использован для определения массы объекта, обычно для белка и дезоксирибонуклеиновой кислоты (ДНК). Нить ДНК, когда вводится в химические вещества, может ускорить или замедлить информационный процесс. ДНК-маркеры известной массы используются для аппроксимации размеров объектов, путешествующих после окончания электрофореза. Электрофорез, скорее всего, будет наиболее часто используемым инструментом для молекулярных биологов и биохимиков.
Существует два типа электрофореза, которые обычно используются в этом процессе. Это электрофорез в полиакриламидном геле с додецилсульфатом натрия (SDS-PAGE) и электрофорез в нативном геле..
SDS-PAGE - это неселективный метод гель-электрофореза, используемый в таких областях, как биохимия, криминалистика, биология и генетика для отделения белка от его электрофоретической подвижности. SDS представляет собой анионное поверхностно-активное вещество, которое можно использовать для помощи в лизировании клеток во время выделения ДНК и для разделения белков в SDS-PAGE. Во время электрофореза смесь белка сначала разжижают в растворе SDS. Затем применяется вещество под названием меркаптоэтанол, чтобы удалить дисульфидные связи, чтобы сделать белок линейным. Затем начинается электрофорез. Результаты дали бы два остатка молекул, один из которых является SDS-PAGE.
Отсутствие SDS-PAGE не является проблемой, так как гель-электрофорез все еще можно сделать только из-за того, что белки не теряют всю свою вторичную и третичную структуру и не распадаются на обычно прямые палочки.
Между тем, нативный гель-электрофорез использует гель в качестве противоконвективной среды. Обычно он используется для разделения биологических макромолекул, таких как ДНК, рибонуклеиновая кислота (РНК) и белок. Он также может быть использован для разделения наночастиц.
В нативном гель-электрофорезе используются два основных геля, а именно:
Агарозный гель, который используется для больших молекул. Этот гель не идентифицирует небольшие различия между двумя молекулярными полосами. Он также используется исключительно для разделения ДНК. Визуализация агарозного геля осуществляется с помощью смеси бромистого этидия..
Полиакриламидный гель, который используется для небольших молекул. Этот гель идентифицирует различия между молекулярными полосами. Помимо ДНК, он также может отделять белки.
Резюме:
1.SDS-PAGE - это неселективный метод гель-электрофореза, используемый в таких областях, как: биохимия, криминалистика, биология и генетика для отделения белка от его электрофоретической подвижности, в то время как гель-электрофорез обычно используется для разделения биологических макромолекул, таких как ДНК, рибонуклеиновая кислота (РНК) и белок. Он также может быть использован для разделения наночастиц.
2. Нативный гель-электрофорез имеет два типа, а именно: агарозный гель и полиакриламидный гель.